Wat is het antibiogram?
Het antibiogram is een microbiologische test die wordt gebruikt om de gevoeligheid van een micro-organisme voor een of meer antimicrobiële geneesmiddelen te testen.
Het antibiogram wordt voornamelijk gebruikt op gezondheidsniveau en wordt traditioneel uitgevoerd op monsters van bacteriekolonies die zijn afgeleid van eenheden die zijn verzameld via keel-, urethrale, rectale of vaginale uitstrijkjes, of geïsoleerd uit ontlasting-, urine- of sputummonsters.
Uitvoerende technieken en antibioticaresistentie
Het antibiogram wordt vaak uitgevoerd met de agar-diffusiemethode, ook wel de Kirby-Bauer-techniek genoemd.
Tijdens de procedure wordt een bacteriemonster genomen uit de kolonies en gezaaid (op de juiste manier) op het juiste medium, waarin ook schijven gedrenkt in antibiotica in bekende concentraties (gedicteerd door therapeutische behoeften) worden verdeeld.De plaat wordt vervolgens in een incubator geplaatst en na een vooraf bepaalde periode (bijv. 18 uur bij 35 ° C) kan een relatief uniforme microbiële groei worden gewaardeerd, met min of meer grote halo's rond de schijven van absorberend papier. van de bacterie voor elk afzonderlijk getest antibioticum wordt beoordeeld: als de diameter groot is, is het micro-organisme gevoelig voor het geneesmiddel (S), als het klein is, heeft de bacterie een gemiddelde gevoeligheid (I of MS), terwijl als het verwaarloosbaar of zelfs afwezig is, is de onderzochte bacteriesoort resistent (R) tegen het geneesmiddel. Om de bacteriële gevoeligheid nauwkeurig te bepalen, wordt de diameter van de remmingszones gemeten in mm, waarbij de verkregen waarden worden vergeleken met de standaardwaarden voor de bacteriestam.
Hoe antibioticaresistentie te voorkomen?
Antibiotica zijn NIET effectief tegen virussen; typische virale infecties zijn verkoudheid, griep, laryngitis, bronchitis, kroep en de meeste keelpijn (faryngitis).
Het gebruik van antibiotica wanneer ze niet strikt noodzakelijk zijn en op indicatie van de arts, kan het fenomeen antibioticaresistentie bevorderen (bacteriën zijn "antibioticaresistent" wanneer ze niet door het antibioticum kunnen worden gedood).
LET OP: het is de bacterie die resistent is tegen het antibioticum, NIET het individu. Daarom kunt u, zelfs als u nog nooit antibiotica heeft gebruikt, infecties krijgen die worden veroorzaakt door antibioticaresistente bacteriën.
Om het ontstaan van antibioticaresistentie te voorkomen, is het van fundamenteel belang om de door de arts voorgeschreven therapie af te ronden; zelfs als het goed voelt, stop niet voortijdig met het nemen van antibiotica.
Wanneer tijdens het antibiogram de halo's van de aangrenzende schijven met elkaar versmelten, worden de betreffende antibiotica als synergetisch beschouwd.
Als alternatief voor de zojuist beschreven methode kan het antibiogram ook worden uitgevoerd op vloeibaar medium, waarbij na incubatie de troebelheid wordt geëvalueerd die overeenkomt met verschillende gradaties van verdunning van het geneesmiddel (zie hieronder).
Het antibiogram is nu een essentieel onderzoek geworden, gezien de nu wijdverbreide verspreiding van het fenomeen resistentie tegen geneesmiddelen. Door het verkeerde antibioticum te kiezen of een breedspectrummedicijn te gebruiken om deze procedure te vermijden, kunnen in feite bacteriestammen worden geselecteerd die resistent zijn tegen de werking van hetzelfde.In het artikel dat aan dit onderwerp is gewijd, hebben we gezien hoe dit vermogen oorspronkelijk wordt verkregen door spontane mutaties en vervolgens overgedragen op andere bacteriën. Het is dan ook geen toeval dat de ontdekking en het klinische gebruik van veel antibiotica hand in hand zijn gegaan met de opkomst van bacteriën die resistent zijn tegen hun werking.Vaak is het de schuld van een ongepast en overdreven gebruik van deze geneesmiddelen, bijvoorbeeld voor de behandeling van virale infecties waartegen ze volledig nutteloos blijken te zijn (de enige mogelijke rechtvaardiging is het voorkomen van bacteriële superinfecties bij mensen die risico lopen).
Twee zeer belangrijke parameters afgeleid van het antibiogram zijn de MIC en de MBC:
- MIC (Minimum Inhibiting Concentration): is de laagste concentratie van de testverbinding die nodig is om de groei van een bepaald micro-organisme te remmen.
- MBC (minimale bacteriedodende concentratie): is de laagste concentratie van de testverbinding die nodig is om de dood van meer dan 99,9% van een bepaalde microbiële populatie te veroorzaken.
Om de MIC in vaste media door antibiogram te evalueren, wordt aangenomen dat het microbiële middel van de schijf in de agar diffundeert en een concentratiegradiënt creëert; bijgevolg, hoe verder weg van de schijf, hoe lager de concentratie van het geneesmiddel, die progressief afneemt totdat het de kritische concentratie bereikt (minimale remmende concentratie benaderde MIC). Voorbij dit punt is er confluente groei, terwijl in het gebied dat zich het dichtst bij de schijf bevindt geen groei is.
In het antibiogram op vloeibaar medium wordt een reeks reageerbuisjes bereid met daarin het kweekmedium en schilferende verdunningen (in de verhouding van 2) van het te testen antibioticum. In elk van deze reageerbuizen wordt een standaardhoeveelheid van de onderzochte microben geënt; incubatie en onderzoek van hetzelfde volgt. Zoals verwacht, is in aanwezigheid van troebelheid bacteriële groei zichtbaar, terwijl een oplossing die helder blijft, duidt op een volledige remming van microbiële groei, wat de optimale werkzaamheid van het geneesmiddel onderstreept. In dit geval vertegenwoordigt de MIC (minimale remmende concentratie) de hoogste verdunning (d.w.z. de laagste concentratie) van antibioticum dat in staat is om de groei van het micro-organisme volledig te remmen. De MBC (minimale bacteriedodende concentratie) wordt in plaats daarvan vastgesteld door de monsters genomen uit het vloeibare medium in een geschikt vast medium te laten groeien en eventuele bacteriële groei te evalueren. De MIC komt dus overeen met de concentratie antibioticum die aanwezig is in de reageerbuis waarin het geneesmiddel het meest is verdund en die bij kweekonderzoek geen enkel teken van bacteriële activiteit vertoont (zie figuur).
De resultaten van het antibiogram worden gepubliceerd op een specifiek rapport, waarin de gebruikte antibiotica en de relatieve MMC's worden vermeld; soms worden ook de combinaties van antibiotica die kunnen worden gebruikt en de mate van resistentie van de micro-organismen vermeld.
De traditionele methoden voor het uitvoeren van het antibiogram, die zeer nuttig zijn voor didactische doeleinden, evolueren voortdurend. Tegenwoordig zijn er bijvoorbeeld geautomatiseerde commerciële systemen beschikbaar, terwijl de absorberende papieren schijfjes kunnen worden vervangen door strips met oplopende doses antibioticum, passend aangegeven op de strip zelf (E-test voor antibiogram).
